Application Note QPix 460でサンプルハンドリングを最適化

はじめに

寒天を充填したQTrayは、細菌コロニーの大規模な培養とスクリーニングに使用されます。48ウェルディバイダーを追加することで、複数の細菌サンプルを同じQTray上で個別に培養することができます（図1 左）。通常、QPix™ 460でのプレーティングはディバイダー付きQTrayを用いることで容易に実施できます。しかし、ディバイダーなしのQTrayでも複数の細菌サンプルを培養することは可能ですが、クロスコンタミネーションへの懸念を解消する必要があります。本ノートでは、QPix460のカスタマイズされたプレーティング機能を活用し、ディバイダーなしのQTrayにプレーティングを行いながら、サンプル間のクロスコンタミネーションを最小限に抑える方法をご紹介します。

QPix 460 自動微生物コロニー選択装置は、寒天を充填したQTrayへのサンプルプレーティングが可能です。96サンプルを30分でプレーティングできます。QPix 460のデフォルトのプレーティングパターンは、ディバイダー付きQTray用に設計されています。しかし、QPix 460ソフトウェアのPlating Pattern Editorを使用することで、カスタムプレーティングパターンを作成する柔軟性が得られます。これにより、ディバイダーなしのQTrayにプレーティングする際、サンプル間に十分な間隔を確保し、コンタミネーションを防ぐための小さなプレーティングパターンを作成できます。

カスタムプレーティングパターンの作成

Plating Pattern Editorは、QPix 460ソフトウェアのPlating Processes内にあります（図2）。Plating Editorウィンドウで、カスタムプレーティングパターンを作成し、追加することができます（図3）。

QTrayへのE.coliプレーティング

部分スパイラルプレーティングパターン（図4B）を作成後、QPix 460のプレーティングプロセスを使用し、スプレッディングヘッドとピンを組み合わせて、さまざまな濃度に希釈したE.coliをディバイダーなしのLB寒天QTrayにプレーティングしました。QPix 460は各E.coliサンプルを40µLピペットし、部分スパイラルプレーティングパターンを使用するように設定しました。

プレーティング後、QTrayは37°Cで一晩インキュベートしました。翌日、QPix 460で白色光イメージングを行い、QTray全体をイメージングしました（図5Bおよび図6B）。

黄色枠部分の拡大図は図6に示します。

結論

部分スパイラルプレーティングパターンを使用することで、各サンプル間に十分なスペースが確保され、サンプル同士が混ざることなく、コロニーの成長も認められませんでした。これにより、QPix 460はディバイダー付きQTrayだけでなく、ディバイダーなしのQTrayにもクロスコンタミネーションなしで複数サンプルをプレーティングできることが示されました。同じ部分プレーティングパターンの方法は、Nunc™ OmniTrays™にも適用可能です。

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