タンパク質の検出、定量、分析 タンパク質の定量プロセスを合理化
タンパク質の検出、定量、分析
タンパク質の検出、定量、分析は、多種多様な生物学的プロセスを研究する上で中心的な役割を果たします。タンパク質の濃度を測定することは、タンパク質の精製や標識から電気泳動用のサンプル調製に至るまで、様々なプロセスで必要とされます。
タンパク質の定量は、サンプル中の総タンパク質濃度の測定です。タンパク質は、280 nmの吸光度を用いて直接定量することも、比色分析法(BCA、ブラッドフォードなど)や、より高感度などの利点を持つ蛍光分析法を用いて間接的に定量することもできます。複雑な試料、例えば血清や細胞溶解液中の特異性タンパク質を同定・測定するには、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)を用いることができます。
細胞シグナル伝達やその他の生物学的プロセスは、蛍光タンパク質を用いて解析することができます。例えば、緑色蛍光タンパク質(GFP)を生きた細胞で発現させ、実験条件下での局在やタンパク質の動態を可視化するのに用いることができます。トリプトファンは、その蛍光発光特性が微小環境によって影響を受けるアミノ酸であり、タンパク質のコンフォメーション状態の変化に関する情報を得るためにも用いられてきました。
タンパク質の検出、定量、分析を支援する製品・サービス
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SpectraMax iD3/iD5
マルチモードマイクロプレートリーダー大型タッチスクリーンを備えた高感度マイクロプレートリーダー
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SpectraMax L
マイクロプレートリーダー96および384ウェルマイクロプレート用のプログラム可能な
インジェクターオプションを備えた高感度ルミノメーター -
Gemini XPSおよびEM
マイクロプレートリーダーフィルター不要の蛍光検出
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SpectraMax QuickDrop
微量分光光度計微量吸光分光光度計でDNA、RNA、タンパク質をワンタッチ定量
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SpectraMax ABS / ABS Plus
マイクロプレートリーダーフィルター不要で幅広いアッセイを迅速に行える吸光プレートリーダー
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FlexStation 3
マルチモードマイクロプレートリーダーイオンチャネル・GPCR活性の測定に威力を発揮する
自動マルチチャンネルピペッター搭載マルチマイクロプレートリーダー -
SpectraMax i3x
マルチモードマイクロプレートリーダー研究ニーズに合わせて進化できるマイクロプレートリーダー
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SpectraMax Mシリーズ
マルチモードマイクロプレートリーダー妥協ない性能と低価格を両立したマルチモードマイクロプレートリーダー
タンパク質の定量と分析法
吸光、蛍光、発光の各検出モードを備えたマイクロプレートリーダーは、タンパク質の定量と研究に多用途のソリューションを提供します。アプリケーションノートでは、これらの機器を使用してどのように結果を得、分析できるかを紹介しています。
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ELISA法
酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)は、マイクロプレートフォーマットを使用して特異性タンパク質の量を測定するために使用され、結果は可視波長域の吸光度によって検出されることがほとんどです。化学発光および蛍光ELISAフォーマットは、あまり多量でない分析物を正確に定量するために感度が向上しています。
ELISA法を見る > -
蛍光タンパク質の応用
真核細胞内のタンパク質は、合成と分解のバランスを高度に制御しながら、ダイナミックな状態で存在しています。タンパク質合成は数十年の研究によりよく理解されていますが、タンパク質分解に関する知識はここ20年で大きく進歩しました。蛍光タンパク質は、タンパク質分解と関連する細胞シグナル伝達経路を調べるためのレポーターとして使用できます。
蛍光プロテアソームセンサーがどのように使用されてきたかについては、アプリケーションノートをご覧ください。
蛍光および化学発光ライブセルレポーターのマルチプレックスによるNFkBシグナル伝達要件の解明 >
BD Biosciencesプロテアソームセンサーを用いたAnalyst® GT、FLEXstation®、Gemini EMマイクロプレートリーダーによる生細胞中のプロテオソーム阻害の測定 > -
IgG定量
治療用タンパク質工学および細胞株開発において、IgG定量は、遺伝子組み換え細胞株が産生する、治療用タンパク質の一般的なクラスである免疫グロブリンG(IgG)の量を測定するプロセスです。これは、細胞株の生産性を評価・モニタリングし、抗体治療薬のさらなる開発に最適な候補を選択するために重要です。
創薬・開発におけるクローンスクリーニングのためのハイスループットIgG定量プラットフォーム >
ポスター:創薬開発におけるクローンスクリーニングのためのハイスループットIgG定量プラットフォーム >
血清検体中のSARS-CoV-2スパイクおよびヌクレオカプシドIgG抗体の定性測定 >
ウイルス学とワクチン研究 マイクロプレートリーダーソリューション > -
タンパク質濃度の測定(ブラッドフォード、BCAなど)
タンパク質濃度は、UV分光光度計で280nmの吸光度を用いて直接測定することも、BCAやブラッドフォードアッセイなどの比色分析法を用いて間接的に測定することもできます。また、蛍光測定法を用いてタンパク質を定量することもできます。
タンパク質定量に関するアプリケーションノートをいくつかご紹介します。
SpectraMax iD5リーダーでBCAベースのタンパク質定量を効率化 >
SpectraMax ABS Plusマイクロプレートリーダーで細胞溶解液中の総タンパク質を測定 >
EMax Plusマイクロプレートリーダーによるタンパク質定量 >
SpectraDrop™Micro-Volumeマイクロプレートを用いたタンパク質の直接定量 >
NanoOrangeタンパク質キットをSpectraMaxマイクロプレートリーダーで使用する場合 > -
トリプトファン検出
タンパク質の固有蛍光は、芳香族アミノ酸であるトリプトファン、チロシン、フェニルアラニンに起因します。トリプトファンはタンパク質の発光を支配し、溶媒の偏光や局所環境に最も敏感です。トリプトファン蛍光の変化を分析することで、タンパク質の変性やコンフォメーションに関する情報を得ることができます。
このアプリケーションノートでは、SpectraMax®マルチモードマイクロプレートリーダーのトリプトファン蛍光測定アッセイに対する性能を示します。
SpectraMax iD3マイクロプレートリーダーで固有トリプトファン蛍光を測定します >
SpectraMax i3 マルチモードマイクロプレートプラットフォームによるトリプトファンの本質的検出 > -
ウエスタンブロッティング
ウエスタンブロッティングは、タンパク質の検出と定量によく用いられる技術です。比色分析、蛍光、化学発光など、ウェスタンブロットメンブレン上のタンパク質を検出するために使用される様々な技術について学びます。また、マルチモードマイクロプレートリーダーを用いた、これまでにない新しいウェスタンブロット検出システムについてもご紹介します。
ウェスタンブロットを見る >