配信開始までお待ちください
SpectraMax i3xマルチモードマイクロプレートリーダー
ミュートを解除する
0:00
1:58
/
ライブ
 
x1.0
再生速度
x2.0
x1.6
x1.4
x1.2
x1.0
x0.5
自動
画質
自動 (高画質)
高画質
中画質
通信節約
オフ
字幕
オフ
日本語
音声
パーツサイズ
再生速度
x1.0
画質
自動 (高画質)
音声
字幕
オフ
音声
画質
自動 (高画質)
高画質
中画質
通信節約
字幕
オフ
日本語
再生速度
x2.0
x1.6
x1.4
x1.2
x1.0
x0.5

酵素 - IMAP評価キット

酵素 - IMAP評価キットとは

IMAP®テクノロジーは、基質ペプチドの配列に関係なく、様々なキナーゼ、ホスファターゼ、ホスホジエステラーゼに適用可能なホモジニアスアッセイを提供します。このアッセイは、混合して読み取るだけの簡単な手順で、酵素活性を正確に測定することができます。


・IMAPは、キナーゼ、ホスファターゼ、ホスホジエステラーゼをスクリーニングするための完全なアッセイシステムを提供する。
・IMAPアッセイは抗体ベースではないので、汎用性があり、あらゆるキナーゼ、ホスファターゼ、ホスホジエステラーゼに使用できる。
・ロバスト性の蛍光シグナルにより、信頼性の高い結果が得られ、Zファクターも良好である。
・IMAPアッセイはホモジニアスであり、コスト削減のための小型化が可能である。
・IMAPアッセイは、FPおよびTR-FRET検出モードの両方が利用可能で、ユーザーのスクリーニングニーズに対応する。

酵素 - IMAP評価キット

    ホスホ基と3価の金属含有ナノ粒子(ビーズ)との特異的で親和性の高い相互作用に基づくIMAPは、キナーゼ、ホスファターゼ、ホスホジエステラーゼ活性を評価するための汎用的な非抗体ベースのプラットフォームである。蛍光標識した基質を用いて酵素反応を行う。IMAP Binding Systemを添加すると酵素反応が停止し、ビーズとリン酸化基質との結合が始まる。酵素活性に相関する基質のビーズへの結合は、読み出しとしてFPまたはTR-FRETを用いて検出することができる。

    IMAPプログレッシブバインディングシステム

    IMAP Progressive Binding Systemにより、研究者は使用する基質ごとにFPおよびTR-FRETアッセイ条件を最適化できる。このシステムはProgressive Binding Buffer AとProgressive Binding Buffer B、およびProgressive Binding Reagentで構成されている。2つのバッファーと試薬は、選択する基質の酸性特性、望ましいATP濃度、バックグラウンドパラメーターに応じて、異なる割合で組み合わせることができる。

    IMAP基質

    モレキュラーデバイスは、検証済みの基質およびキャリブレーターを幅広く提供しています。基質は、本来バリデートされた酵素と共に使用することも、他の酵素の基質として使用することもできます。


    ・最適化された結合条件を持つ検証済みのIMAP基質は、IMAPプラットフォームの使用時に最高のパフォーマンスを保証します。
    ・基質には2種類のサイズがあり、IMAP FPとIMAP TR-FRETの両方で使用可能
    ・ 数十種類の基質が100種類以上の酵素で検証されています。多くの基質が赤または緑の蛍光ラベルで利用可能で、マルチプレックスを可能にし、化合物の自家蛍光から生じる問題に対処する方法を提供する。

酵素 - IMAP評価キットのデータ

   
  • サンプルIMAP FPデータ: ROCKII希釈曲線

    サンプルIMAP FPデータ: ROCKII希釈曲線
    Progressive Binding Systemを用いたBSAおよびTween IMAP Reaction Buffer中のROCKIIの酵素希釈曲線。反応条件 ROCKIIキナーゼ(Upstate: 14-451)、100 nM FAM-S6由来基質(5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH、R7184)、100 µM ATP。IMAP結合溶液の条件: 100% Binding Buffer A、Progressive Binding Reagent 1:400。

  • FPとTR-FRET検出の比較

    FP対TR-FRET検出
    スタウロスポリンによるAkt阻害: IMAP TR-FRET検出(上)とIMAP FP検出(下)の比較。反応条件: Aktキナーゼ(0.1u/ml、Upstate:14-276)、300 nM、1µM、3µM FAM-Crosstide(5FAM-GRPRTSSFAEG-COOH、R7110)、10 µM ATP、スタウロスポリンは指示通り。IMAP結合溶液: 40% Binding Buffer A、60% Binding Buffer B、Progressive Binding Reagent 1:400。

酵素 - IMAP評価キットの技術

  • IMAP FP キナーゼおよびホスファターゼ汎用アッセイ

    IMAP FP キナーゼおよびホスファターゼ汎用アッセイ
    FP読み出しを用いたIMAPの原理: 蛍光標識ペプチドを用いたキナーゼ反応後に結合液を添加する。リン酸化された小さな蛍光基質は、大きなM(III)ベースのナノ粒子に結合し、基質の回転速度を低下させ、蛍光偏光を増加させる。

  • IMAP FP汎用ホスホジエステラーゼアッセイ

    IMAP FP汎用ホスホジエステラーゼアッセイ
    FP読み出しを用いたIMAP原理: 蛍光標識基質を用いたホスホジエステラーゼ反応後に結合液を添加する。リン酸化された小さな蛍光基質は、大きなM(III)ベースのナノ粒子に結合し、基質の回転速度を低下させ、蛍光偏光を増加させる。

  • IMAP TR-FRET 一般的なキナーゼおよびホスファターゼアッセイ

    IMAP TR-FRET 一般的なキナーゼおよびホスファターゼアッセイ
    TR-FRET読み出しを用いたIMAPの原理: 蛍光標識ペプチドまたはタンパク質を用いたキナーゼ反応後に、結合溶液を添加する。このシステムでは、ナノ粒子にテルビウム(Tb)-ドナー分子をスパイクする。スパイクされたM(III)ベースのナノ粒子に結合することで、リン酸化された蛍光基質がTb-Donorに近接し、Tb-Donorとリン酸化された蛍光基質との間のTR-FRETを測定することができる。

  • IMAP TR-FRET 汎用ホスホジエステラーゼアッセイ

    IMAP TR-FRET 汎用ホスホジエステラーゼアッセイ
    TR-FRET読み出しを用いたIMAPの原理: 蛍光標識基質を用いたホスホジエステラーゼ反応の後に、結合溶液を添加する。このシステムでは、ナノ粒子にテルビウム(Tb)-ドナー分子をスパイクする。スパイクされたM(III)ベースのナノ粒子に結合することで、リン酸化された蛍光基質がTb-Donorに近接し、Tb-Donorとリン酸化された蛍光基質との間のTR-FRETを測定することができる。

酵素 - IMAP評価キットに対応する製品・サービス

  • FlexStation 3 マルチモードマイクロプレートリーダー

    イオンチャネル・GPCR活性の測定に威力を発揮する
    自動マルチチャンネルピペッター搭載マルチマイクロプレートリーダー

  • SpectraMax Paradigm マルチモードマイクロプレートリーダー

    高速で設定可能なマイクロプレートリーダー1台でハイスループットスクリーニングが可能

  • SpectraMax i3x マルチモードマイクロプレートリーダー

    研究ニーズに合わせて進化できるマイクロプレートリーダー

  • SpectraMax Mシリーズ マルチモードマイクロプレートリーダー

    妥協ない性能と低価格を両立したマルチモードマイクロプレートリーダー