ロンドン大学
企業／大学
ロンドン大学
チームメンバー
ロンドン大学 構造分子生物学部門 教授 Andrea Townsend-Nicholson
使用製品
FLIPR Tetraハイスループットカイネティックセルベースアッセイシステム
SpectraMax i3xマルチモードマイクロプレートリーダー
課題
アンドレア・タウンゼント・ニコルソン教授は、個人のためのオーダーメイド治療薬の開発を支援する個別化医療に関心を寄せている。
アンドレアのグループの研究は、主に細胞外シグナルがどのように細胞内反応に伝達されるかを理解することに重点を置いている。特に、これらのプロセスにおけるセル表面レセプターの役割の解明である。彼らは、特異性細胞表面レセプターに作用する薬剤を開発するために、高性能コンピューターと実験的研究を統合したアプローチを用いている。このアプローチにより、各患者の標的レセプターの構造のコンピューターモデルを開発することができ、レセプター・タンパク質の配列における変異やゲノム研究も含まれる。開発した化合物は、イン・シリコと実験の両方でテストすることができる。つまり、新薬の開発にかかるコストを削減し、臨床治療にかかる時間を短縮することである。計算機で重要な作業の大部分を行い、実験的にすべてが期待通りに機能することを確認するのである。研究チームは現在、この方法を用いて抗肥満薬の「やせる薬」を開発している。研究チームはまた、新技術の開発、特に治療用の3Dバイオロジカルアーキテクチャを開発するための組織エンジニアリングの利用にも興味を持っている。
細胞表面受容体の研究のために、チームはGPCRやイオンチャネルによるカルシウム動員、イオンチャネルの活性化やイオン輸送体タンパク質に関連した膜電位変化をモニターするためのハイスループットなソリューションを必要としていた。
解決策
研究チームは、FLIPR® Tetraハイスループット・セルラー・スクリーニング・システムを用いて、カルシウムシグナル伝達と膜電位アッセイを実施した。FLIPRシステムは、GiまたはGs共役受容体を認識するが、アデニルシクラーゼとは相互作用せず、PLCßを活性化するキメラGタンパク質サブユニットを用いたcAMPアッセイにも使用される。
cAMPを測定する別の方法として、当グループではSpectraMax i3x マルチモードマイクロプレートリーダーを用いて、cAMPのhTR-FRETアッセイを行っている。このシステムは、SpectraMax Quant dsDNAアッセイキットを用いて、NGSイルミナシーケンス用のdsDNAを定量するためにも使用される。さらに、これらのキットは、ヒトマイクロバイオームおよびアースマイクロバイオームプロジェクトの一環として、医学生や分子生物学生の教育に使用されています。
使用製品
結果
これらのソリューションは、アンドレアの研究だけでなく、彼女の教育活動の進歩も支え、若手研究者が研究にハイスループットなアッセイを取り入れる手段を提供した。
アンドレアのグループはFLIPRカリウムアッセイキットの検証にも携わった。彼らはFLIPR Tetraシステムを用いて、このキットがホモジニアスで洗浄不要のプロトコルを用いてヒトKCC2陽イオン-塩化物共輸送体の機能活性測定に使用できることを実証した。BTC-AMのような従来の色素と比較して、簡素化されたプロトコールとロバスト性アッセイ品質が、FLIPR Tetraシステムのハイスループット機能と相まって、hKCC2コトランスポーターのモジュレーターをスクリーニングする強力なソリューションとなることを示した。
「FLIPRカリウムアッセイキットは大きなアッセイウィンドウと優れた再現性を示した。
アンドレア・タウンゼント・ニコルソン
関連情報
FLIPRカリウムアッセイキットを用いた細胞ベース塩化カリウムトランスポーターアッセイの開発
