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Yashraj Biotechnology社 ImageXpress Nanoを活用し、
マルチパラメトリックイメージングと分析を大幅に改善

企業/大学

ヤシュラージ・バイオテクノロジー・リミテッド

チームメンバー

シュウェタ・バット博士:最高科学責任者兼研究開発責任者

使用製品

ImageXpress®Nano自動イメージングシステム
SpectraMax® iD5マルチモードマイクロプレートリーダー
MetaXpress®ハイコンテント画像取得・解析ソフトウェア

課題

心毒性、肝毒性、神経毒性などの領域における予期せぬ毒性は、臨床治療における深刻な合併症であり、開発中の有望な薬剤候補の失敗の主な原因の一つである。動物実験は、開発中の様々な治療薬の前臨床安全性評価を行う毒性学研究に広く用いられてきた。血液脳関門の薬物浸透、薬物代謝、関連毒性における種差は、動物モデルからヒトへの薬物試験の失敗の一因となっている。既存の創薬システムは、不死化細胞株、ヒト疾患モデル動物、ヒトでの臨床試験に依存してきた。さらに、前臨床段階で安全性が確認された薬剤候補が、臨床段階で毒性を示すことも少なくない。ヒトへの使用が承認される医薬品は、平均して約16%に過ぎない。

ImageXpress Nanoに切り替える前、Yashraj Biotechnologyは位相差顕微鏡と蛍光顕微鏡を使用していたが、スフェロイド/オルガノイドモデルのZ-スタック画像を取得する機能がなく、画像解析ソフトウェアも持っていなかった。

"ImageXpress Nano自動イメージングシステムは、3D細胞凝集体から全細胞や細胞内小器官まで、様々なサンプルのイメージングに優れた柔軟性を提供します。"
- ヤシュラージ・バイオテクノロジー、チーフ・サイエンティフィック・オフィサー、シュウェタ・バット博士

解決策

Yashraj Biotechnology社は幹細胞領域で最先端の研究を展開しており、ImageXpress Nano自動イメージングシステムにより、自社開発したiPSC由来の肝細胞、心筋細胞、神経細胞、さらに数種類のマルチパラメトリックアッセイをより効果的にイメージングできるようになった。

使用製品

  • SpectraMax iD5 マルチモードマイクロプレートリーダー

    SpectraMax® iD5マルチモードマイクロプレートリーダーは、吸光度、蛍光、発光を測定します。さらに、TRF および FP を測定し、TR-FRET、HTRF®、BRET、インジェクター付きデュアルルシフェラーゼレポーターアッセイ、ウェスタンブロット検出に拡張できます。

  • ImageXpress Nano 自動イメージングシステム

    ImageXpress® Nano自動イメージングシステムでは、長寿命な固体光源と適切なアッセイ感度を確実に提供する光学系を採用しています。この強力で柔軟な自動蛍光顕微鏡ソリューションにより、様々な細胞や細胞内小器官の鮮明な画像を取得することができます。
    このシステムには、2Dおよび3Dイメージングとタイムラプス解析のためのツールを備えたMetaXpress®ソフトウェアが含まれており、簡単な操作性で独自のアッセイをデザインすることができ、様々なニーズに応えます。

結果

「ImageXpress Nano自動イメージングシステムは、3D細胞凝集体から細胞全体や細胞内小器官まで、様々なサンプルのイメージングに優れた柔軟性を提供します。従来の蛍光顕微鏡とは異なり、[ImageXpress Nano]は3D構造体(スフェロイド/オルガノイド)の異なる面全体に焦点を合わせることができます。また、湿度、CO2、温度制御によるサンプルの環境制御が可能で、タイムラプス実験や生細胞イメージングが可能です。MetaXpress®ハイコンテント画像取得・解析ソフトウェアは、カスタムプロトコルを設定する柔軟性を持ちながら、特異性実験用にあらかじめ定義されたプロトコルを用いたイメージングと解析を可能にします。全体として、ImageXpress Nanoシステムは、マルチパラメトリックでハイスループットなイメージングと解析のための優れたプラットフォームです。」

 - ヤシュラージ・バイオテクノロジー、チーフ・サイエンティフィック・オフィサー、シュウェタ・バット博士

図: 神経突起伸長アッセイ: 未処理およびタキソール処理細胞のβ-チューブリン(緑)染色によるiPSC由来前脳運動ニューロンの代表イメージング。化合物で3日間処理した前脳運動ニューロンを固定し、抗ß-チューブリン(TUJ-1)で染色した。

図: 多能性iPS細胞は多能性マーカーを発現する。(A)、Oct-4 (B)Nanog(C)SSEA4。核はDAPI(青)でカウンター染色した。

図: 細胞骨格の破壊: 未処理およびラトルンクリン処理細胞のアクチン(緑)染色によるiPSC由来肝細胞の代表イメージング。化合物で3日間処理した肝細胞を固定し、抗ファロイジン-アクチンで染色した。

図: TUNELアッセイ: 未処理およびドキソルビシン処理細胞のTUNEL(緑)およびヨウ化プロピジウム(赤)染色によるiPSC由来心筋細胞の代表イメージング。化合物で3日間処理した心筋細胞を固定し、TUNELとPIで染色した。

図:iPS細胞由来の神経前駆細胞は、神経前駆マーカーPAX6とNestinを発現している。核はDAPI(青)でカウンター染色した。

図: A. iPSC由来前脳運動ニューロンは神経マーカーTuj1を発現する。B. iPSC由来アストロサイトは神経マーカーGFAPを発現し、C. iPSC由来中脳ドーパミン作動性ニューロンは神経マーカーチミジンヒドロキシラーゼ(TH)を発現する。核はDAPI(青)でカウンター染色。

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